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兔溶菌酶檢測試劑盒實驗操作小竅門

發布時間: 2022-10-22  點擊次數: 102次
  兔溶菌酶檢測試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛孕酮(P)水平。用純化的牛孕酮(P)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入孕酮(P),再與HRP標記的孕酮(P)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的孕酮(P)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中牛孕酮(P)濃度。
  兔溶菌酶檢測試劑盒實驗操作小竅門:
  1、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
  2、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
  3、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  4、要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
  5、樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。
  6、為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
  7、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
  8、ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
  9、剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5、0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
  10、人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11、每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
  12、手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
  13、對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
  14、沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
  15、在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
  16、吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
  17、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
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